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带大家详细了解下肝素琼脂糖凝胶应用规范都有什么?

 发布时间:2022-04-15 点击量:297
   肝素琼脂糖凝胶稳定性好,基团脱落少,使用寿命长,使用方便,应用广泛。可用于抗凝血因子Ⅲ、凝血因子、蛋白合成因子、脂蛋白、干扰素、核酸结合蛋白、限制内切酶、凝血酶及类凝血酶等生物大分子的分离纯化。肝素能和凝血因子和其他血浆蛋白,脂蛋白,蛋白质合成因子,作用于核酸和类固醇受体的酶,所以凝胶可以用于这类物质的纯化。
  肝素琼脂糖凝胶应用规范:
  1)该凝胶从冷室或冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温,然后再装柱,以免产生气泡影响柱效;
  2)吸附:20-50mM,pH7.4-8.0的缓冲液,为避免离子交换的干扰,缓冲液中可以适当加50mM-100mM的NaCl,,zui常用的为Tris-HCl缓冲液;
  3)洗脱:可以用pH7.4-8.0的缓冲液加0.2-2M进行阶段或者线性洗脱;
  4)上样样品必须与平衡柱子的缓冲液的pH、电导相同;
  5)不同的样品,吸附和洗脱方法不相同,可以根据相关的文献进行;
  6)凝胶亲和填料的再生处理方法:先用0.1M Tris-HClpH7.0缓冲液洗3个柱床体积,然后用0.1M NaOH含2MNaCl流洗3个床体积,后用20%乙醇洗 3个床体积即可。长时间用酸碱洗填料会是填料的吸附能力下降,所以清洗要尽量缩短时间;
  7)该亲和填料保存条件为20%乙醇,4-8℃。
 

肝素琼脂糖凝胶