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如何选择合适的透析袋,关系到试验的准确性

 发布时间:2022-05-18 点击量:85
   透析已成为生化实验室简便、常用的分离纯化技术之一。透析的主要作用是消炎杀菌、深层清洗、深层排毒,有利于皮肤吸收。生物大分子生产过程中,除盐、去除少量有机溶剂、去除生物大分子杂质、浓缩样品等都要采用透析技术。透析袋通常是半透膜制成的袋状容器。

  透析袋的选择
 
  1、选择合适的截留分子量。
  截留分子量的选择基于膜内预约的大分子的分子量和去除的小分子污染物的分子量。为了达到合理有效的分离,需要分离的两种物质的分子量比例至少为25。选择陷阱分子量经验法则:为了得到至少90%的保持率,选择陷阱分子量的值约为所保持的高分子分子量的一半。
  分子量差超过100倍时,可以同时确保高收率和高纯度。
  分子量差为10倍时,为了追求高收率,可以选择低截留分子量;为了追求高纯度,可以选择高截留分子量。例如,在产品(CytC,20KD)和杂质(vitB12,2kd)的情况下,将重点放在收率上,选择分级分子是提高产品分子量的80%-100%以及收率,用分级分子量20KD的膜进行CytC和vitb12以纯度为重点,但以收率为代价,选择分级分子量高的膜,样品的保持率为50%-80%左右,用分级分子量为50KD的膜分离CytC和VitB12,达到收率76%左右和约2%的B12的残留。
  对于分离几个分子的应用,分子间的分子量差至少要5倍才能完成有效的膜透析。如果不能满足分子量差异要求,可能需要使用其他分离技术,如色谱法和切向流过滤。
  2、选择合适的扁平宽度(体积)
  渗透袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。小透析管透析更快;大的透析管由于扩散距离长,透析慢。为了方便使用,建议使用全长(包括封闭夹和顶部空间)约10-15cm的透明包。
  3、选择合适的透析膜材质
  各个膜的亲和性因分子而异。对球蛋白,相对结合亲和性由低到高CE<;RC<;PVDF。

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